高效脂质体转染试剂U-300 细胞培养

产品特点：
提供优良的性能，以针对难转染的细胞系实现了较高转染效率的试剂
转染试剂对细胞作用温和，毒性很低
相比其他转染试剂具有更高的转染效率和更低的用量 适用细胞更加广泛，有效转染难于转染的细胞系
能有效转染的细胞类型包括：
肺癌细胞（A549、NCI-H460）骨肉瘤细胞（U-2 OS、Saos-2）
结肠癌细胞（Caco2、SW480）胰腺癌细胞（PANC-1）
皮肤黑色素瘤细胞（SK-MEL-28）成纤维细胞（3T3、COS-7）
肝细胞（HepG2、HuH7）红白血病细胞（K562）
乳腺癌（MCF7、Hs578T）前列腺癌（LNCap）
成肌细胞（C2C12、L6 CRL-1458）
产品规格：
（备注：以下为常用规格，更多规格可根据客户需求定制）

储存事项: 冰袋或者湿冰运输，短时间内可室温运输，但需避免光源热源。
长时间储存于 4℃，切勿冻存，有效期24个月。
产品用于：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。
警告！产品对人体危害性未知，请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套！如果不小心接触，应立即用大量的水冲洗，如引起身体不适应前往医院治疗。
注意事项: 转染siRNA至细胞时，遵循如上所述的DNA实验方案，但在稀释siRNA 时不要加入 B-300试剂。在无血清培养基中制备 DNA-U33-300复合物，直接将其加入含细胞培养基的细胞中。(有无血清或抗生素均可 ） 转染后无需去除转染复合物或者更换/添加培养。 整个实验过程避免细胞污染，由于不同细胞耐受性不同，我们建议您在做批量实验前，可根据实际质粒和细胞的转染效率，分不同梯度量先做预实验，摸索最佳DNA和U33-300 Transfection Reagent的混合比例。步骤里面测试推荐的两种浓度的并非固定浓度，优化后可根据自身细胞情况调整用量。
操作步骤：
（以六孔板的贴壁细胞DNA转染为例) 细胞准备。
1.转染前一天将细胞接种至六孔板内，细胞接种数量视其生长速度和细 6 胞系类型而定，一般为0.5-1×10 个细胞。
2.转染时要求细胞生长的汇合度为70~90%，转染前两小时对细胞进行换液。(细胞状态与转染效果影响很大，选择最佳的细胞状态更有利于转染效率提高和转后细胞状态的恢复） 将3.75 μl和7.5 μl 的U33-300分别加至另外125 μl无血清的OPTI-MEM培 养基中，轻轻混匀，室温静置2-3分钟。
3. 将5 ug 质粒DNA (0.5-5μg/μL) 加入到250μl无血清OPTI-MEM培养基稀释，制 DNA 预混液匀，然后添加10 ul B300 试剂并充分混匀。
4.在每管已稀释的U-300试剂中加入等体积稀释的 DNA孵育10-15分钟。
5.将DNA和U33-300混合液滴加至六孔板的孔内，前后左右晃动孔板混匀，置于培养箱中培养。
6.转染18-48小时后，倒置荧光显微镜下观察荧光蛋白表达，或加入抗性培养基筛选稳定表达细胞系单克隆。
用量参照表：